DNA釋放劑是可以直接用新鮮的動(dòng)物、植物、細(xì)菌樣品制備可以直接進(jìn)行 PCR、LAMP擴(kuò)增的模板
由于試劑需要用戶自己針對(duì)不同的物品摸索用量，所以在使用時(shí)有幾下幾點(diǎn)注意事項(xiàng)
1..未列出樣品，用戶需要自己摸索用量。對(duì)富含多醌多酚的植物材料(如棉花)， 組織使用量不要超過(guò) 0.5mg。
2. 加入 100 uL 溶液 A 工作液，確保固體樣品被溶液淹埋，如果是液體樣品則震蕩 混勻。
3. 95℃保溫 10 分鐘。
4. 待冷卻到常溫后加入 10uL 溶液 B 并混勻得 DNA 釋放液。這些 DNA 釋放液足夠 進(jìn)行 50-100 次 PCR 或 LAMP 擴(kuò)增。
5.DNA 釋放液體積不要超過(guò) PCR 體積的 1/10。
6. 放入 PCR 儀中進(jìn)行 PCR，PCR 參數(shù)需要根據(jù)引物 Tm 值和靶分子長(zhǎng)度等參數(shù)設(shè) 置。一般不低于 35 次循環(huán)。
7. PCR 結(jié)束后取 5-10 uL 直接上樣電泳(本產(chǎn)品不需要上樣液即可直接上樣)，紅 色染料電泳速度相當(dāng)于 50 bp DNA 片段。
8. 如果沒(méi)有預(yù)期的擴(kuò)增，細(xì)胞裂解液中可能是有 PCR 抑制劑(植物、土壤和血液等 DNA 樣品常含此類(lèi)抑制物)，建議把細(xì)胞裂解液分別稀釋 10 倍和 100 倍再用 3uL 進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增。也可以在 PCR 體系中加入 1/10 的本公司的 PCR 抑制物清除劑。
