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酶聯(lián)免疫吸附試驗方法

更新日期: 2023-08-29
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牛(CaMKKβ)ELISA試劑盒科研實驗,不做其他用途。檢測類型:雙抗體夾心法測抗原、雙抗原夾心法測抗體、間接法測抗體、競爭法測抗原、捕獲包被法測抗體、ABS-ELISA法。
酶聯(lián)免疫吸附試驗方法:
1、間接法(indirect elisa)
a.將已知抗原吸附于固相載體,酶標(biāo)記二抗。
b.檢測液相中未知抗原。
2、雙抗體夾心法(sandwich elisa)
a.將已知抗體吸附于固相載體,酶標(biāo)記一抗。
b.檢測液相中可溶性抗原。
3、競爭法(competitive elisa)
a.將已知抗體或抗原吸附于固相載體,酶標(biāo)記抗體或抗原。
b.檢測液相中可溶性抗原或抗體。
酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。當(dāng)前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
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