天天躁狠狠躁狠狠躁性色av学生,色婷婷亚洲十月十月色天,亚洲欧美一区二区三区不卡,777爽死你无码免费看一二区

您的位置: 網(wǎng)站首頁 >> 技術(shù)文章 >> 豬偽狂犬病毒實(shí)時熒光PCR試劑盒的操作方法

豬偽狂犬病毒實(shí)時熒光PCR試劑盒的操作方法

更新日期: 2023-09-19
瀏覽人氣: 1415
病毒DNA的提取:
1.取出已處理的樣品、陰性對照和陽性對照,分別加入600µL抽提液(用抽提液之前不要晃動,不要吸到上層保護(hù)液),用力顛倒10次混勻,12,000rpm離心10min。
2.取500µL上清置于滅菌離心管中,加入500µL異丙醇,混勻,置液氮中3min或-70℃冰箱中30min。取出樣品管,室溫融化,13,000rpm離心15min。
3.棄上清,沿管壁緩緩加入1mL洗滌液,輕輕旋轉(zhuǎn)一周后倒掉,將離心管倒扣于吸水紙上1min,再將離心管真空抽干15min或37℃烘干。
4.用30µL無菌水溶解沉淀,作為模板備用。
樣品制備:
1.樣品采集:病死或撲殺的豬,取大腦海馬背側(cè)皮層、中腦、腦橋、扁桃體、淋巴結(jié)等組織;待檢活豬,用棉拭子取鼻腔分泌物,置于50%甘油生理鹽水中,或用注射器取血5mL,2~8℃保存。(要求送檢病料新鮮,嚴(yán)禁反復(fù)凍融。)
2.樣品處理:
2.1組織樣品的處理:稱取組織0.1g于研磨器中磨碎,再加1mL生理鹽水繼續(xù)磨至無塊狀物;然后將樣品轉(zhuǎn)至1.5mL滅菌離心管中,8000rpm離心5min,取上清100µL于1.5mL滅菌離心管中,加入500µL裂解液和10µL蛋白酶K,混勻后37℃溫育1h。
2.2全血樣品的處理:待血凝后取血清放于離心管中,8000rpm離心5min,取上清100µL于1.5mL滅菌離心管中,加入500µL裂解液和10µL蛋白酶K,混勻后37℃溫育1h。
2.3陽性對照的處理:混勻后取100µL于1.5mL滅菌離心管中,加入500µL裂解液和10µL蛋白酶K,混勻后37℃溫育1h。
2.4陰性對照的處理:混勻后取100µL于1.5mL滅菌離心管中,加入500µL裂解液和10µL蛋白酶K,混勻后37℃溫育1h。
PCR:
1.反應(yīng)體系:分別取16µLPCR反應(yīng)液A(用前混勻)、2µLPCR反應(yīng)液B(用前混勻)和2µL模板DNA,混勻。
2.反應(yīng)程序:在PCR儀上運(yùn)行以下程序:94℃3min;94℃30s、55℃30s、72℃30s,35個循環(huán);72℃延伸10min。
電泳:
1.制膠:用50倍稀釋的TAE電泳緩沖液配制1%瓊脂糖凝膠。
2.電泳:待膠凝固后,取5µLPCR擴(kuò)增產(chǎn)物點(diǎn)樣于瓊脂糖凝膠孔中,以5V/cm的電壓于50倍稀釋的TAE電泳緩沖液中電泳。
3.染色:取50倍稀釋的TAE電泳緩沖液30mL,加入10µL染色液,混勻后將膠浸泡30min,于紫外燈下觀察結(jié)果。
分享到:
版權(quán)所有©2019 上海晅科生物科技有限公司 備案號:滬ICP備19006485號-1
  • 掃一掃,關(guān)注我們

亚洲日本韩国欧美云霸高清| 国产凸凹视频一区二区| 日本欧美一区二区三区高清| 一本久久综合亚洲鲁鲁五月天| 蜜桃视频一区| 无码人妻精品一区二区在线视| 亚洲欧美日韩精品久久| 激情伊人五月天久久综合| 八一影院| chese老妇mon熟女| 亚洲黄色录像| 极品影院| 亚洲精品www久久久| 粉嫩网| 日本亚洲天堂| 亚洲色图欧美另类| jzjzjz亚洲丰满少妇| 91香蕉国产| 中文无码字幕中文有码字幕| 国产69精品久久久久999小说| 国产欧美中文日韩在线综合网| 国产av无码专区亚洲av中文| 久久99中文字幕人妻| 久久亚洲精品人成综合网| 日韩成av人片在线观看| 成人精品免费视频在线观看| 久久久久黑人强伦姧人妻| 无码精品A∨在线观看十八禁| 精品国际久久久久999波多野| AV无码人妻中文字幕| 97无码免费人妻超级碰碰碰碰| 文中字幕一区二区三区视频播放| 国产精品午夜福利在线观看地址| 秋霞鲁丝片无码一区二区| 韩国精品一区二区三区四区| 无码日韩精品一区二区免费| 无遮挡十八禁污污网站免费| 中国成熟妇女毛茸茸| 无码无遮挡又大又爽又黄的视频| 国语自产偷拍精品视频偷| 蜜桃臀AV高潮无码|